期刊简介
江苏省预防医学领域首家公开发行的科技期刊，及时反映江苏省预防医学业务水平和学术水平，将江苏省及其它地区预防医学的先进技术、方法和最新信息反馈给各级预防医学工作者，是江苏省预防医学领域各学科进行学术交流的前沿阵地。内容侧重于预防医学领域内各学科的学术研究及方法探讨，兼顾基层工作者的实践经验交流。
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- 杂志名称：江苏预防医学杂志
- 主管单位：江苏省卫生厅
- 主办单位：江苏省疾病预防控制中心 江苏省预防医学会
- 国际刊号：1006-9070
- 国内刊号：32-1446/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中), CA 化学文摘(美)
利用CRISPR/Cas9基因编辑技术抑制肠出血性大肠埃希菌O157∶H7StxⅡ基因表达
樊欢；吴涛；朱小娟；葛以跃；曾晓燕；焦永军；史智扬；朱凤才；崔仑标
关键词：CRISPR/Cas9基因编辑技术, EHEC O157∶H7菌株, 志贺毒素
摘要：目的 利用CRISPR/Cas9基因编辑技术抑制肠出血性大肠埃希菌(EHEC) O157∶H7 StxⅡ基因表达,并评价其对细菌生长的影响及细胞毒性.方法 针对EHEC O157∶H7 StxⅡ基因设计引物,构建CRISPR/Cas9表达质粒pdCas9-StxⅡ并转化EHEC O157∶H7感受态细胞,采用RT-PCR及胶体金法检测StxⅡ基因表达情况,绘制菌株生长曲线,将菌株培养上清液接种Vero细胞观察细胞病变情况.结果 测序分析显示pdCas9-StxⅡ表达质粒被成功构建;转化EHEC O157∶H7(00G097)感受态细胞后,StxⅡ基因mRNA、蛋白表达均受抑制,EHEC O157∶H7生长曲线未受影响(P值均＞0.05).pdCas9-StxⅡ-00G097菌株培养上清液对细胞的毒性效应(CPE为30％)显著低于对照菌株00G097和pdCas9-00G097 (CPE均＞80％).结论 成功构建的pdCas9-StxⅡ表达质粒能特异抑制EHEC O157∶H7 StxⅡ基因表达、降低细胞毒性,为进一步研究志贺毒素StxⅡ在EHEC O157∶H7致病机理和基因工程减毒活菌苗奠定了基础.
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