期刊简介
江苏省预防医学领域首家公开发行的科技期刊,及时反映江苏省预防医学业务水平和学术水平,将江苏省及其它地区预防医学的先进技术、方法和最新信息反馈给各级预防医学工作者,是江苏省预防医学领域各学科进行学术交流的前沿阵地。内容侧重于预防医学领域内各学科的学术研究及方法探讨,兼顾基层工作者的实践经验交流。
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- 杂志名称:江苏预防医学杂志
- 主管单位:江苏省卫生厅
- 主办单位:江苏省疾病预防控制中心 江苏省预防医学会
- 国际刊号:1006-9070
- 国内刊号:32-1446/R
- 出版周期:双月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中), CA 化学文摘(美)
高致病性禽流感病毒H5N1亚型核蛋白NP真核表达载体的构建、表达与鉴定
彭海燕;迟莹;李燕;卞倩
关键词:高致病性禽流感H5N1亚型, 核蛋白, 克隆, 真核表达
摘要:目的 构建高致病性禽流感病毒H5N1亚型核蛋白(NP)的真核表达载体,并在哺乳动物细胞中表达、鉴定其编码重组蛋白NP.方法 采用RT-PCR法扩增NP基因,T-A克隆到pMD18-T载体中构建pMD18-T-NP质粒.经PCR、双酶切鉴定后,双酶切阳性质粒与pXJ40-HA载体,电泳后胶回收,连接目的片段,构建pXJ40-HA-NP质粒,经PCR、双酶切、测序分析鉴定为阳性的质粒即为NP蛋白的真核表达载体.转染293T细胞后,采用免疫印迹法(Western blot)鉴定重组NP蛋白的表达.结果 成功构建了高致病性禽流感病毒H5N1亚型NP基因的真核表达载体,并在293T细胞中成功表达出分子量为56kD的重组蛋白.结论 成功构建的NP蛋白真核表达载体为进一步研究其功能,研发商致病性禽流感病毒H5N1亚型的诊断、治疗方法和疫苗奠定了基础.
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